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受激發(fā)射損耗(STED)顯微鏡原理
時間:2023-08-03 15:38來源:訊技光電作者: 技術(shù)部點擊:次打印
摘要


                                                                   
受激發(fā)射損耗(STED)顯微鏡描述了一種常用的技術(shù),以實現(xiàn)在生物應(yīng)用的超分辨率。在這種方法中,兩束激光—一束正常,一束轉(zhuǎn)變成甜甜圈模式—被疊加到熒光樣品上。通過使用熒光過程的發(fā)射和損耗以及利用由此產(chǎn)生的飽和效應(yīng),與通常的顯微鏡技術(shù)(例如,寬視場顯微鏡)相比,后反射光顯示出更高的分辨率。在本文檔中,介紹了這種設(shè)備的基本設(shè)置。為了模擬飽和效應(yīng),在焦點區(qū)域采用等效孔徑。
 
任務(wù)說明                                                                           

 
多重光源                                                                           
   

 
螺旋相位板                                                                           

 
探測器插件                                                                           

 
參數(shù)運行 

                                                                         
 
為了實現(xiàn)焦點區(qū)域的z-掃描,可以執(zhí)行參數(shù)運行。使用此工具,用戶可以輕松改變整個光學(xué)系統(tǒng)的單個參數(shù)或一組參數(shù)。有關(guān)詳細(xì)信息,請參閱:
 
Usage of the Parameter Run Document
                                                                                
非時序建模

                                                                       
 
將通道配置模式切換設(shè)置為Manual Configuration后,用戶可以為系統(tǒng)中的每個表面指定為模擬打開哪些通道。運行模擬時,將對活動光路進(jìn)行初步分析(通過所謂的Light Path Finder)。然后引擎將沿著這些光路將場追蹤到系統(tǒng)中存在的探測器。
 
Channel Setting for Non-Sequential Tracing
                                                                                
總結(jié) – 組件…           

                                                            


 
系統(tǒng)觀感

                                                                 
 
 
發(fā)射&損耗激光 

                                                                        
 
光在焦點區(qū)域中的傳播表明,來自損耗激光的光會產(chǎn)生環(huán)形光斑,其中中心孔徑小于發(fā)射激光的焦斑。由于兩個光束在目標(biāo)上的熒光過程中競爭,這導(dǎo)致信號激光的有效光束尺寸更小。
 
                                                                                
3D STED 輪廓

               
                                                     
注意:由于這個簡化的例子不包括實際的熒光效應(yīng),我們?yōu)榱丝梢暬康膶蓚激光束進(jìn)行了歸一化。
 
受激發(fā)射損耗效應(yīng)                                                                          
 
為了近似飽和損耗的影響,我們在焦點位置對發(fā)射激光的結(jié)果應(yīng)用了孔徑效應(yīng)?讖降膮(shù)大致基于損耗激光的焦點輪廓(600nm 直徑,25% 邊緣)。通過系統(tǒng)傳播回探測器平面表明,由于這個過程,光斑變得非常小。


 
VirtualLab Fusion 技術(shù)                                                                          

                                                                                
文件信息 


 
進(jìn)一步閱讀
• Simulation of Multiple Light Source in VLF
• Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy
 
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